教学建议

果蝇唾腺染色体制片方法的改进

　　1 果蝇的培养

　　培养基为常规的玉米粉培养基，培养基要松软、含水量较高、发酵良好。放入7～8对果蝇，在18℃恒温培养。待幼虫出现后，将其移至10～12℃恒温培养，稍低的温度有利于幼虫的充分生长发育，实验时选用肥大的三龄幼虫作为材料(最好选雌性幼虫)。

　　2 唾腺的剥离

　　将幼虫放在滴有一滴低渗液(0.075% KCl)的载片口，实验者两手各持一枚解剖针(或大头针)，在解剖镜下左手用解剖针压住幼虫尾端1/3处，右手用解剖针自幼虫口沟慢慢地向前拉出，一对唾腺也随之被拉出。拉出的唾腺带有脂肪体，在低渗液下处理几分钟，用解剖针疏松，即可剥离脂肪体(泡沫状)，分离出纯净的唾腺，因为低渗可使脂肪体吸水膨胀而容易剥离。

　　3 制片

　　将剥离后的腺体在室温下用1N盐酸水解1min左右，用滤纸条吸干盐酸溶液，再滴一滴清水或低渗液，约1min后用滤纸条吸干。重复3～4次，即可洗净残留的盐酸，以免影响染色效果。这样水洗可避免传统制片中水解后水流冲洗时使腺体丢失。染色用改良的石碳酸品红溶液，在室温下染色5～10min，然后压片。取一片干净的盖玻片和一个双面刀片，盖片时在盖玻片和载玻片间边缘处放一双面刀片，在盖玻片上用解剖针柄轻轻敲压，使盖玻片和载玻片间的液体流动，靠流动的力量将染色体臂伸展开，待将染色体完全压散后(没有红色)，将刀片取出，再用中指轻轻压片，使细胞充分分散。镜检即可看到分散良好、染色体臂充分伸展的染色体，比常规的压片方法要好得多，几乎每张装片中都可以找到伸展良好的染色体。对分散伸展较好的唾腺染色体装片，也可制成永久玻片标本。

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